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高中生物基因专题 标记(繁体:記)基因的筛选原理?

2025-02-09 06:16:52SoccerSports

标记基因的筛选原理?标记基因是一种已知功能或已知序列的基因,能够起着特异性标记的作用。在基因工程意义上来说,它是重组DNA载体的重要标记,通常用来检验转化成功与否;在基因定位意义上来说,它是对目的基因进行标志的工具,通常用来检测目的基因在细胞中的定位

标记基因的筛选原理?

标记基因是一种已知功能或已知序列的基因,能够起着特异性标记的作用。在基因工程意义上来说,它是重组DNA载体的重要标记,通常用来检验转化成功与否;在基因定位意义上来说,它是对目的基因进行标志的工具,通常用来检测目的基因在细胞中的定位。

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标记基因可以是特有的抗性基因,成功导入并表达该标记基因的生物就具有相应的抗性,据此判断基因表达载体是否成功导入细胞内.此外,标记基因也可以是用放射性同位素标记的基因,通过检测放射性来判断基因表达载体是否成功导入受体细胞.

在基因表达载体中,由于构建载体的目的不同,需直播吧要的标记基因也不同。有的标记基因是质粒固有的,有的标记基因是另外加上的.一般情况下,质粒载体在基因组中有1~2个筛选标记,为寄主提供易{拼音:yì}于检测的表型特征.

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在高中生物选修3的教科书中,基因工程专题中常用的标记基因均为存在于质粒上的抗性基因,如抗四环素基因,将目的基因接到含该标记基因的质粒澳门伦敦人上,再将重组质粒导入受体细胞。理论上,受体细胞#28如大肠杆菌#29就对四环素表现抗性,当人们用选择培养基#28比如含有四环素的培养基#29来培养受体细胞时,能够在培养基中存活下来的受体细胞就可以认为是[练:shì]成功地导入了重组质粒,这样,成功导入重组质粒的细胞就被选择出来。

在此,需要注意的是,标记基因只是筛选成功导入基因表达载体的受体细胞的一种工具,只是间接地证明包含目的基因的基因表达载体导入成功,不能为目的基因是否成功融合到受体细胞提供直接证据。因此,在上述选择性培养基中,能够存活下来的细胞,只能证明细胞体内存在拥有标记基因的质粒,不能直接表明质粒上-定存在目的基因,即这种细胞不一定能表达出人们想要的细胞产物.接下来要进行目的基因的检测与鉴定,对存活的受体细幸运飞艇胞从分子水平到个体水平进行逐级检测,从而得到目的基因成功导入rù 并表达的直接证据。

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