分子生物学复习题及其答案分（fēn）子生物学的问题？

分子生物学的问题？1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇？保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇

分子生物学的问题？

1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇？

保存在冰箱中的[de]酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易yì 降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇。8-羟基喹啉是带有淡黄色的固体粉沫，不仅能抗氧化，并在一定{拼音：dìng}程度上能抑制DNase的活性。

2.如何将不同构型的质《繁体：質》粒DNA区别开？

由于不同构型的DNA在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率不同，ccc DNA的泳动速度最快，通过凝胶电[繁：電]泳方法【fǎ】可将不同构型的DNA区别开。

3.用酚-氯仿抽提细胞基jī澳门金沙因组DNA时，通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇，为什么？

异戊醇可以降低(pinyin：dī)表面张力，从而减少气泡产生。另外，异戊醇有助于分相，使离心后（读：hòu）的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。

4.用乙醇沉淀DNA时，为什么加入单价的de 阳离子？

用乙醇沉淀DNA时，通常要在溶液中加《pinyin：jiā》入单价的《拼音：de》阳离子，如NaCl 或 NaAc，Na 中和DNA分子上的负电荷，减少DNA分子之间的同性电荷相斥力，而易于聚集沉淀。

5.在提取RNA时经常使用异硫氰酸胍，有什么作用【pinyin：yòng】？

RNA是一种极易降解的核酸分子。高浓度强变性剂异[拼音：yì]硫氰酸胍使shǐ 细胞结构迅速被破坏，使RNA从细胞中释放出来。同时高浓度异硫氰酸胍还使细胞内（读：nèi）的RNA酶失活，使释放出的RNA不被降解。

6.蛋白印迹中[练：zhōng]封闭液的作用？

封闭液的作用是封闭未吸附蛋白的部位，以减少非特异性结（繁体：結）合背【繁：揹】景的影响。常用的封闭bì 液有脱脂奶粉、小牛血清等。

7.DNA通常保存在什么缓冲液中？

采用TE缓冲液，Tris-HCl的缓冲系[繁体：係]统，加入EDTA可以螯合二价金属离子进而抑制依赖于二价金属离子的DNA酶的活性，对(繁体：對)DNA起到保护作用。

8.在酶切反应缓冲液中为什{拼音：shén}么加入BSA？

通过提高溶液中蛋白质（繁体：質）的浓度，对酶起保护作用。

9.简单的克隆载体必需包括kuò 什么？

复制起点；选择标记：主要是抗性基因；多克隆位点：便（读：biàn）于外源DNA的插入。

10.用酚幸运飞艇抽提细胞DNA时，有什么作用{yòng}？

使《pinyin：shǐ》蛋白质变性。

11.在分离DNA时，要{练：yào}使用EDTA，为什么？

EDTA是金（拼音：jīn）属离子螯合剂，螯合二价离子，抑制核酸酶的活性。

12.在分离DNA过程中，造成DNA分子断裂的因素有【练：yǒu】哪些？

核澳门巴黎人酸酶降解；化学降jiàng 解；物理剪切。

13.使用离《繁：離》心机应注意什么？

首先应该根据自己的实验（读：yàn）需求选择合适的离心机和转子以及离心管，使用离心机时的工作转速不应该超过离心机、转子以及离心管的最大允许转速。离心前注意严格平衡样品。安装转子和转(繁体：轉)子盖要规范、准确。离心时要留人看守，发现离心机异常应立即关闭离心机。离心结束后要安放好转子

14.分子澳门博彩生物学实验室常用的（de）灭菌方法有哪些？

高压蒸汽灭菌、干热灭菌、化直播吧学药剂消毒、过滤【lǜ】除菌

15.使[shǐ]用移液器有哪些注意事项？

垂直吸液、慢吸慢放；选择合适的量程范围，不能超过量程使(pinyin：shǐ)用；选择与移液器匹配的枪头，安装枪头时不要用力太猛；移液器每【练：měi】日用完后，应旋到最《pinyin：zuì》大刻度。