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使用培养基的注意事项(繁:項)

2025-02-12 11:03:35Open-SourceComputers

MS培养基母液配制有哪些注意事项?①一些离子易发生沉淀,可先用少量蒸馏水溶解,在按配方顺序依次混合;②配制母液时必须用蒸馏水或重蒸馏水;③药品应用化学纯或分析纯;④溶解生长素时,可用少量0.5–1N的NaOH或95%酒精溶解,溶解分裂素类用0.5–1N的HCl加热溶解

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MS培养基母液配制有哪些注意事项?

①一些离子易发生沉淀,可先用少量蒸馏水溶解,在按配方顺序依次混合;

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②配制母液时必须用蒸馏水或重蒸馏水;

开云体育药(繁:藥)品应用化学纯或分析纯;

④溶解生【拼音:shēng】长素时,可用少量0.5–1N的NaOH或95%酒精溶解,溶解分裂素类用0.5–1N的HCl加热[繁体:熱]溶解。

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MS培养基使用的注意事项?

其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,它的硝酸盐含量高,其养分的数量和比例合适,能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广,多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。MS固体培养基可用于诱导愈伤组织,也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养,其液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。

总结配置培养基的注意事项?

  这里主要归纳一般情况下的培养基配制关键点,因为培养基的配制使用非常重要,从一开始就该避免异常的出现,主要有以下几个方面。

  (1)溶化:一般应放在玻璃器皿或搪瓷齐内。加{jiā}入蒸馏水,隔《读:gé》水加热以促其溶解,加热时应经常搅拌,防止焦结,待其溶解后(繁:後)补足水分。

  在使用干燥培养基时,先将蒸馏水按定量{liàng}加入容器中,然后称取一(练:yī)定量培养基干粉放入水中,静置10—15min,搅拌,振荡,或延长时间以促进溶解,一般不要热,必要《读:yào》时加热,但时间不宜过长,温度不宜过高,避免某些营养成分被破坏.

  (2) 校正酸碱度(调节pH):培养基必须有适【pinyin:shì】当的pH.因此测定pH是培养娱乐城基配制过程中的重要步骤之一,测定pH的标准温度为25士2℃.调节pH可用无菌的 1mol/l氢氧化钠溶液或10%碳酸钠溶液、1mol/l盐酸溶液.当调节缓冲液的pH时,宜用6mol/l磷酸或10mol/l氢氧化钾溶液.灭菌后 的pH会比灭菌前的pH升高或降低,一般高压灭菌前培养基的pH会比最终pH调高0.2左右,灭菌后基本合适。

  因此对培养基、缓冲液、试剂在灭菌前后的 pH均进行测定,并记下每次pH的测定结果,有助于积累数据考察每种培养基、缓冲液、试剂对灭菌程序的{de}耐受性,从而指导灭菌前pH的调节.干燥培养基一般已校正过pH,用时也必须再验证.测定时,一般用指示剂滴入培养基观察《读:chá》其颜色的变化,或(pinyin:huò)用pH计(繁体:計)校正,如与所需pH不符,可用以上的酸或碱液加以校正.调 整pH后要加热过滤,使培养基澄清.

  (3)培养基的分装:大批量配制时使用的自动分(练:fēn)配器须经校准和确认.每次使用【拼音:yòng】前后,均要对分配器的管道系统进行冲洗,在分装无菌培养基《读:jī》前,则要采用无菌硅胶管.

  固体培养基一般分装(繁:裝)在250ml、500ml锥形瓶中,高压灭菌后根据需要分装平(练:píng)皿或huò 试管.

  平皿:倾注平皿,应在无菌室中(练:zhōng)放fàng 置3—4h,如用塑料平皿须在35℃培养箱中倒置30—60min.让水蒸汽自然蒸发。

  斜面:制备低层斜面分装于试管,约占容积1/5,灭菌后《繁体:後澳门新葡京》趁热斜放在细玻璃棒和木杆上,使成斜度,分装使注意管口和瓶塞上勿沾有培养基,如沾有培养基应用布抹去,以避免污染.

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  高层斜【拼音:xié】面:制备高层斜面分装于试管,澳门永利约占试管容积的1/3,灭菌后趁热放置成高层短斜面,待其凝固后应用。

  分装好的培养基或缓冲液等及时密封后必须在配制当(繁:當)天(2h内最佳【拼音:jiā】)进行灭菌处理.液体、半固体培养基一般在高压灭前分装,约装试管容积的1/3,在灭菌后还要加其他成分的液体、半固体培养基,灭菌后再分装于灭菌试管或锥形瓶中.

  培养基的灭菌:培养基的灭菌多采用高压蒸汽灭菌,各种培养基的灭菌时间和压力,按其成分不同而定.普通培养基采用121℃、103.42kPa灭菌 15min,但容器和装量较大时,应延长至20min.含糖培养基115℃、68.85kPa灭菌30min.含糖、血清、鸡蛋等培养基【拼音:jī】可用流动蒸汽及血 清凝固器80—100℃、30min,连续3d,间歇灭菌.血清或组织液,采用低热56—58水浴1h,连续5—6d灭(繁:滅)菌,一些遇高温即被破【拼音:pò】坏的物质如尿 素、腹水等,可用细菌过滤器,过滤除菌.

  高压灭菌应严格按照操作规程执行,必澳门博彩[读:bì]须逐渐加热,彻底排除灭菌器内的空气,再逐渐升压保持预定的压力和时间,达到 全部杀灭微生物.以上的灭菌时间和温度要经过验证确认,如不同类型培养基混合一起灭菌时宜采用115℃、68.85kPa灭菌30min为好

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