进行微生物学检验时,对临床标本的采集有何要求?标本的采集非常重要。细菌感染通常是通过培养的方法检测的,而病毒通常是通过抗原或者核酸来检测的。细菌培养和鉴定,以及药敏试验,是合理使用抗菌药物的前提,好的标本决定一切,这是检验领域的一句俗话
进行微生物学检验时,对临床标本的采集有何要求?
标本的采集非常重要。细菌感染通常是通过培养的方法检测的,而病毒通常是通过抗原或者核酸【练:suān】来检测(繁:測)的(读:de)。
细菌培养和鉴【练:jiàn】定,以及药敏试验,是合理使用抗菌药物的前提,好的标本决定一切,这是检验领域的一句俗话。不恰当的标本、不恰当的采集时间、不规范的采集方《fāng》法,很可能造zào 成假阴性,假阳性,杂菌污染等,延误诊断,危及生命。
对于严重感染,我们是需要确定病原菌的,标本应该选择细菌可能定【拼音:dìng】植的部位,如深部痰液,胸水,血液等,标本提取的时间应该在抗菌药物使用前,最好在发生寒战的时候。标本的(读:de)采集一定要规范,避免把护士或医生手上,导管,或者采集器本身的杂[繁:雜]菌带入标本。
病毒感染较少检测,除了一些特殊[读:shū]的,如肝炎病毒,巨细胞病毒,以及其他【拼音:tā】一些传染病病毒等。病毒要达到一定拷贝量,才能用核酸定量的方法检测出来。而抗原抗体检测,相对来水受到标本影响较小。
痰液标本做DNA提取的处理方法有哪些?
本人不是很清楚我觉得《dé》可以参考:张军力, 托娅, 王育民. 不同的液化方法对痰液DNA提取效果比较[J]. 检验医【练:yī】学, 2009, 24#286#29:456-458
4种不同的液化方法 方法1:50世界杯0 μ L痰液加入5 mL 1 mol/L氢氧化钠, 振摇液化30 min后, 14 000 r/min#28离心xīn 半径为6.8 cm#29离心5 min, 沉淀用1.5 mL去离子水洗, 12 000 r/min#28离心半径为6.8 cm#29离心5 min, 留沉淀待用
方【练:fāng】法2:痰液中加入4倍体积的1 mol/L 氢氧化钠, 混合液化30 min, 80 ℃消化30 min, 取1.5 mL于离心(读:xīn)管, 12 000 r/min#28离心半径为6.8 cm#29离心5 min, 沉淀用三羟甲基氨基甲烷-盐酸#28Tris-HCl#29和乙二胺四乙【拼音:yǐ】酸#28EDTA#29缓冲液洗3次, 12 000 r/min#28离心半径为6.8 cm#29离心5 min, 取沉淀待用
方法3:Saccomanno液#28每50毫升固定液中含50%乙醇48 mL, 2%聚乙二醇亚博体育1 mL、0.3%利福平1 mL#29、 二硫苏糖醇#28DTT#29液#280.1 g DTT、0.78 g氯化钠、0.02 g氯化钾、0.112 g磷酸二氢钠、0.02 g磷酸二氢钾, 加水至2 L, 使{pinyin:shǐ}DTT浓度为0.005%[4]#29等体积混合, 1~2倍体积加入到痰液中, 振摇液化30 min
方法4:痰液用1~2倍bèi 体积液化剂#280.5幸运飞艇%N-乙酸-L半胱氨酸, 1.45%枸橼酸钠, 2%氢氧化钠#29振摇液化30 min。
痰液中DNA提取采用经典的酚-氯【lǜ】仿抽提的方法。加等体积氯仿:异戊醇#2824:1#29混匀, 8 000 r/min#28离心半径为6.8 澳门金沙cm#29离心10 min, 转移上层水相, 加2倍体积无水乙醇和1/10体积3 mol/L醋酸钠, 混匀, -20 ℃ 60 min后, 12 000 r/min#28离心半径为6.8 cm#29离心15 min, 以70%乙醇洗涤1~2次, 室温稍干燥后加入100 μ L Tris-HCl和EDTA缓冲液, 溶解DNA。
吸光度#28A#29检测 应用Beckman Coulter DU800型核酸蛋白分析仪检测波长为260和280 nm处的A。
该文认为方法3:Saccoman亚博体育no法和DTT法的联合应用, 对痰液的固定液(读:yè)化效果较好, 有利于痰液DNA的提取
本文链接:http://21taiyang.com/Open-SourceComputers/6602590.html
微【wēi】生物痰标本采集时间 进行微生物学检验时,对临床标本的采集有何要求?转载请注明出处来源