分子生物学（读：xué）复习题及其答案分子生物学的问题？

分子生物学的问题？1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇？保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇

分子生物学的问题？

1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇？

保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧[读：yǎng]化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇。8-羟基喹啉是带有淡黄色的固体粉沫，不仅能抗【拼音：kàng】氧化，并在一定程度上能抑制DNase的活性。

2.如何将不同构型的质粒DNA区别开[繁体：開]？

由于不同构(繁体：構)型的DNA在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率不同，ccc DNA的泳动速度最快，通过凝胶电泳【拼音：yǒng】方法可将jiāng 不同构型的DNA区别开。

3.用酚-氯仿抽【拼音：chōu】提细胞基因组DNA时（繁：時），通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇，为什么？

异戊醇可以降低表面张力，从而减少气泡产生。另外，异戊醇有助于分相，使《读：shǐ》离心后的上层含DNA的水相、中间的{de}变性蛋白相及下层有机溶（pinyin：róng）剂相维持稳定。

4.用乙醇沉淀DNA时，为什么加入单价{pinyin：jià}的阳离子？

用[pinyin：yòng]乙醇沉淀DNA时，通常要在溶液中加入单价的阳离子，如NaCl 或 NaAc，Na 中和DNA分子上《读：shàng》的负电荷，减少DNA分子之间的同性电荷相斥力，而易于聚集(拼音：jí)沉淀。

5.在提取RNA时经常使用异硫氰酸胍，有(拼音：yǒu)什么作用？

RNA是一种极易降解的核酸分子。高浓度强变性剂异硫氰酸胍使细胞结构迅速被破坏，澳门新葡京使RNA从细胞中释放出来。同时高浓度异硫氰酸胍还使细胞内的RNA酶失活huó ，使释放出的RNA不被降解。

6.蛋白印迹中封闭液的作《读：zuò》用？

封【练：fē澳门新葡京ng】闭液的作用是封闭未吸附蛋白的部位，以减少非特异性结合背景的影响。常用的封闭液有脱脂奶粉、小牛血清等。

7.DNA通(练：tōng)常保存在什么缓冲液中？

采用TE缓冲液，Tris-HCl的缓冲系统，加入EDTA可以螯合二价金属离子进而抑制依赖《繁体：賴》于二价金属离子的DNA酶的活性，对DNA起到保护作zuò 用【拼音：yòng】。

8.在酶切反应缓冲液中为什(练：shén)么加入BSA？

通过提高溶液(读：yè)中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。

9.简开云体育单的克隆载体必需包括什么（繁：麼）？

复制《繁体：製》起点；选择标记：主要是抗性基因；多克隆位点：便于外源DNA的插入。

10.用酚抽提细胞DNA时，有【拼音：yǒu】什么作用？

使[读：shǐ]蛋白质变性。

11.在分离（繁：離）DNA时，要使用EDTA，为什么？

澳门永利EDTA是金属离子螯合剂，螯合二价离子，抑制核酸【练：suān】酶的活性。

12.在{zài}分离DNA过程中，造成DNA分子断裂的因素有哪些？

核酸酶降解；化学降解；物理剪切。

13.使用离心机应注意什{拼音：shén}么？

首先应该根据自己的实验需求选(繁体：選)择合适的离心机和转子以及离心管，使用离心机jī 时的工作转速不应该超过离心机、转子以及离心管的最大允许转速。离心前注意严格平衡样品。安装转子和转子盖要规范、准确

离心时要留人看守，发现离心机异常应立即jí 关闭离【繁体：離】心机。离心结束后要安放好转子。

14.分子生物学实验室常cháng 用的灭菌方法有哪些？

高压蒸汽灭菌、干热灭菌、化学药剂《繁：劑》消毒、过滤除菌

1澳门永利5.使用移液（读：yè）器有哪些注意事项？

垂直吸液、慢吸慢放；选择合适的量程范围，不能超过量程使用；选择与移液器匹{读：pǐ}配的枪头，安装枪头(繁：頭)时不要用力太猛；移液【拼音：yè】器每日用完后，应旋到最大刻度。