石蜡切片的基本【běn】原理

石蜡切片的制作步骤（附图）？1、取材确定所取材料的来源及部位，纵切还是横切；取材要迅速，防止阻止发生进一步变化，材料体积要适宜，下图为植物芽体取样实拍。2、固定最常用的固定液为FAA（万用固定液）。它的优点是材料固定时间不受限制，固定时间短则数小时，长则数月或数年

石蜡切片的制作步骤（附图）？

1、取材

确定所取材料的来源及部位，纵切还是横切；取材要迅速，防止阻止发生进一步变化，材料体积要适宜（pinyin：yí），下图为植物芽体(繁：體)取样实拍。

2、固[pinyin：gù]定

最常用的固定液[pinyin：yè]为FAA（万用固定液）。它的优点是材料固定时间不（练：bù）受限制，固定时间短则数小时，长则数月或数年。冲洗或漂洗：组织固定后应充分水洗，除去留在组织内的固定液及《jí》其结晶沉淀，否则会影响以后的染色效果。下图为固定液浸泡的组织切块。

3、脱水

目的：水和透明剂不能互溶，只有脱去(读：qù)水分后，才能让透明剂进入。

试剂：梯度酒《练：jiǔ》精溶液

流程：70%---85%---95%--100%--- 100% 每步1h-2h左【zuǒ】右。

注意事项：澳门银河保证脱水梯度和每一步脱{繁体：脫}水时间，水要完全脱净，但也不能过度脱水（过久使组织变脆、收缩，这个时间大家可以根据自己的实验来摸索一下，不必完全按照本操作来）。

下图为自动组织【繁：織】脱水机，适于大量样品组织脱[繁：脫]水用。如果材料体积及样品量较少可用小烧杯做容器来进行逐级脱水。

4、浸蜡与包埋[pinyin：mái]

目的：用石蜡取代透明剂[繁：劑]，使石蜡浸入组织而起支持作用。

浸蜡程序:#28恒温（繁：溫）#29

（1）低温浸蜡（36℃）：接上步，在有二甲苯和（拼音：hé）材料的烧杯中逐步加碎蜡至过饱和（石蜡不能溶解），过夜《读：yè》12-24h。

（2）高温浸蜡（55-60℃，高于石蜡熔(拼音：róng)点3℃ ）：

将上步二甲苯与石（读：shí）蜡的混合液倒出，不要倒掉材料，将烧杯中加入纯石蜡，澳门伦敦人共5-24h。纯石蜡需要更换三次。

关于石蜡的选择石蜡(繁体：蠟)熔点：

对于较硬的材料，用（拼音：yòng）熔点较高的石蜡进行包埋；

当切片较薄时（在8μm以下），选用熔点较高的石蜡包埋【读：mái】；

夏季宜采用熔点较高的石蜡(拼音：là)（56，58℃），冬季宜yí 选用熔点较低的石蜡（52，54℃）。

5、切片【拼音：piàn】

传统的切片方法是将包埋好的蜡块用刀片修成规整的梯形，粘于小木块上，上机切片。

新型的切片方法是将包埋框（见下图）代[pinyin：dài]替木块的支撑作用，上机切片。切片的厚度可以根据自己的实验要求(读：qiú)来确定，一般在8μm-20μm范围内。（下图为传统切片机与新型自动切片机）

6、粘片与烤片《练：piàn》

粘片：用粘片剂将蜡片牢附于【练：yú】载玻片上，防止在后续的操作中材料脱落。在《读：zài》载玻片上涂抹粘片剂（甲液），再滴蒸馏水（乙液），放上蜡片，用滤纸吸取多余的水分。

烤片：将载玻片放于（繁：於）40℃展片台中烤干。

7、脱(繁亚博体育体：脫)蜡与复水、染色

脱蜡目的：干燥后的切片需脱蜡及复水才能在水溶性染液《pinyin：yè》中进行染色。

复水目的：脱蜡后的材料，如果不经过复水，直接进入染色剂中，材料将会严重变形，甚至亚博体育难以染《拼音：rǎn》色。

染色目的：使细胞组织内的不《pinyin：bù》同结构【练：gòu】呈现不同的颜色和足够强的差异以便于[繁：於]观察。

澳门银河总体流程：二甲苯→1/2 二甲苯 1/2纯酒精→100%酒精→95％酒精→85％酒精→番红（4h以上）→95％酒精→固绿（迅速）→95％酒精（迅速）→100%酒精→1/2 二甲苯 1/2纯酒精→二甲苯→二甲苯，以上各级约需{拼音：xū}5～10分钟，已注明时间的除外。

染色剂：1%番红（85%酒[pinyin：jiǔ]精配制）

0.5%固（gù）绿（95%酒精配制）

8、切片脱水、透明和封《fēng》固

接上步，在载玻片（练：piàn）上滴加适量（1～2滴）中性树胶，再将洁净盖玻片倾斜放下，进行封片。切片放入【练：rù】42℃温箱中干燥过夜。镜检，将合格的切片贴上标签。封固剂选择加拿大树胶（Canada balsam）或中性树胶。至此，植物《读：wù》组织的石蜡切片大功告成！（下图为加拿大树胶）