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使用培养基【pinyin:jī】的注意事项

2025-02-07 15:10:04Gyms

MS培养基母液配制有哪些注意事项?①一些离子易发生沉淀,可先用少量蒸馏水溶解,在按配方顺序依次混合;②配制母液时必须用蒸馏水或重蒸馏水;③药品应用化学纯或分析纯;④溶解生长素时,可用少量0.5–1N的NaOH或95%酒精溶解,溶解分裂素类用0.5–1N的HCl加热溶解

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MS培养基母液配制有哪些注意事项?

①一些离子易发生沉淀,可先用少量蒸馏水溶解,在按配方顺序依次混合;

②配制母液时澳门金沙必须用蒸馏水或【pinyin:huò】重蒸馏水;

③药品应用化学纯或分澳门威尼斯人析(pinyin:xī)纯;

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④溶澳门新葡京解生长素时,可用少量liàng 0.5–1N的NaOH或95%酒精溶解,溶解分裂素类用0.5–1N的HCl加热溶解。

MS培养基使用的注意事项?

其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,它的硝酸盐含量高,其养分的数量和比例合适,能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广,多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。MS固体培养基可用于诱导愈伤组织,也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养,其液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。

总结配置培养基的注意事项?

  这里主要归纳一般情况下的培养基配制关键点,因为培养基的配制使用非常重要,从一开始就该避免异常的出现,主要有以下几个方面。

  (1)溶化:一般应放在玻璃器皿或搪瓷齐内。加入蒸馏水,隔水{练:shuǐ}加热以促其《练:qí》溶解,加热时应经常搅拌,防止焦结,待其溶解后补足水shuǐ 分。

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  在使用干燥培养基时,先将蒸馏水按定量加入容器中,然后称取一定量培养基干粉放入水中,静置10—15min,搅拌,振荡,或延长时间以促进溶解,一般不要热,必要时加热,但时间不宜过长,温度不宜过高,避免某些营养成分被破坏.

  (2) 校正酸碱度(调节pH):培养基必须有适当的pH.因此测定pH是培养开云体育基配制过程中的重要步骤之一,测定pH的标准温度为25士2℃.调节pH可用无[繁体:無]菌的 1mol/l氢氧化钠溶液或10%碳酸钠溶液、1mol/l盐酸溶液.当调节缓冲液的pH时,宜用6mol/l磷酸或10mol/l氢氧化钾溶液.灭菌后 的pH会比灭菌前的pH升高或降低,一般高压灭菌前培养基的pH会比最终pH调高0.2左右,灭菌后基本合适。

  因此对培养基、缓冲液、试剂在灭菌前后的 pH均进行测定,并记下每次pH的测定结果,有助于积累数据考察每种培养基、缓冲液、试剂对灭菌程序的耐受性,从而指导灭菌前pH的调节.干燥培养基一般已校正过pH,用时也必须再验证.测定时,一般用指示剂《繁:劑》滴入培养基观察其颜色的变化,或用pH计校正,如与所需pH不符,可用以上的酸或碱液加以校正.调 整pH后要加热过滤,使培养基澄清qīng .

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  (3)培养基的分装:大批量配制时使用的自动分配《读:pèi》器须经校准和hé 确认.每次使用前后,均要对《繁:對》分配器的管道系统进行冲洗,在分装无菌培养基前,则要采用无菌硅胶管.

  固体培养基一般分装在250ml、500澳门金沙ml锥形瓶中,高压灭菌后(繁体:後)根据需要分装平皿或试管.

  平皿:倾注平皿,应在无菌室中放置3—4h,如用塑料平皿须在35℃培养箱中[练:zhōng]倒置30—60min.让(繁:讓)水蒸汽自然蒸发。

  斜面:制备低层斜面分装于试管,约占容积1/5,灭菌后趁热斜放在细玻璃棒和木杆上,使成斜度,分装使注zhù 意管口和瓶塞上勿沾有培养基,如沾有培养(繁体:養)基应用布抹去《读:qù》,以避免污染.

  高层斜面:制备高层(繁体:層)斜面分装于[繁体:於]试管,约占试管容积的1/3,灭菌后趁热放置成高层短斜面,待其凝固后应用。

  分装好《拼音:hǎo》的培养基或缓冲液【读:yè】等及时密封后必须在配制当天(2h内最佳)进行灭菌处理.液体、半固体培养基一般在高压灭前分装,约装试管容积的1/3,在灭菌后还要加其他成分的液体、半固体培养基,灭菌后再分装于灭菌试管或锥形瓶[读:píng]中.

  培养基的灭菌:培养{练:yǎng}基的灭菌多采用高压(繁:壓)蒸汽灭菌,各种培养基的灭菌时间和压力,按其成分不同而定.普通培养基采用121℃、103.42kPa灭菌 15min,但容器和装量较大时,应延长至20min.含糖培养基115℃、68.85kPa灭菌30min.含糖、血清、鸡蛋等培养基可用流动蒸汽及血 清凝固器80—100℃、30min,连续3d,间歇灭菌.血清或组织液,采用低热56—58水浴1h,连续5—6d灭菌,一些遇高温即被破坏的物质如尿 素、腹水等,可用细菌过滤器,过guò 滤除菌.

  高压《繁:壓》灭菌应严格按照操作规程执行,必须逐渐加热,彻底排除灭菌器内的空气,再逐渐升压保持预定的压力和时间,达到 全部杀灭微生物.以上的灭菌时间和温度要经过验证确认,如不同类型[读:xíng]培养基混合一起灭菌时宜采用115℃、68.85kPa灭菌30min为(繁体:爲)好

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