求助芽孢杆菌灭菌方法？耐酸耐热菌（库克）的检测方法1 适用范围本方法适用于清汁、浊汁、水和浓缩果汁中的耐酸耐热菌的检测。2 仪器和试剂2.1 恒温水浴：80±1℃。2.2 恒温培养箱：40±1℃。2.3 灭菌培养皿：直径为90mm
求助芽孢杆菌灭菌方法？
耐酸耐热菌（库克）的检测方法1 适用(拼音：yòng)范围
本{pinyin：běn}方法适用于清汁、浊汁、水和浓缩果汁中的耐酸耐热菌的检测。
2 仪器和澳门银河试《繁：試》剂
2.1 恒温水{练：shuǐ}浴：80±1℃。
2.2 恒温培养《繁：養》箱：40±1℃。
2.3 灭(繁体：滅)菌培养皿：直径为90mm。
2.4 灭直播吧（繁：滅）菌试管：18×180mm。
2.5 滤膜：0.45um水系一次[pinyin：cì]性滤膜。
2.娱乐城6 酵母粉。
2.7 蛋白bái 胨。
2.8 琼《繁体：瓊》脂粉。
2.9 葡萄糖。
2.10 吐《读：tǔ》温80。
2.11 12.5%苹果酸《繁：痠》。
2.12 灭菌蒸馏水[练：shuǐ]。
2.13 K氏培养基平板：在1000ml的三角瓶中放入500ml蒸馏水，加入1.25g酵母粉、2.50g蛋白胨、6.50g琼脂粉、0.5g 葡萄糖和0.5ml吐温80，使其溶解，轻轻盖上三角瓶的盖子，在121℃灭菌25分钟；在一个小烧杯中加入10ml蒸馏水和1.25克的苹果酸，搅拌《拼音：bàn》直至溶解，将苹果酸的水溶液用0.45um的滤膜过滤，将处理过的苹果酸水溶液加入到灭菌的K氏培养基中，搅拌均匀，使其pH值达到3.7±0.1。当冷却到[读：dào]大约50℃时，将K氏培养基倾注到培养皿【读：mǐn】中，凝固后在0-5℃的冰箱中储存，有效期60天，并记录配制日期。
3 操作步骤zhòu
3.1 样(拼音：yàng)品处理
3.1.1 浓缩清汁：
打开水浴锅，调整温度到80±1℃。以无菌操作，取10ml浓缩清汁于15ml灭菌的试管中，再移取10ml浓缩清汁于另一带有温度计的15mL的试管中，作为温度控制用，盖上样品试管的盖子。将上述样品试管和温度控制试管放在水浴锅中，当温度达到80±1℃，开始计时，维持13分钟（用计时器计时）。冷却至室温，用90-100ml的灭菌蒸馏水将热处理过的样品转入灭菌容器中，摇匀。将稀释后【pinyin：hòu】的样《繁：樣》品溶液用0.45um的滤膜真空过滤
3.澳门新葡京1.2 清[qīng]汁、水：
打开水浴锅，调整温度到80±1℃。以无菌操作，取150ml清汁（或水）于已灭过菌的玻璃样品瓶中，再移取150ml清汁（或水）于另一带有温度dù 计的玻璃样品瓶中，作为温度控制用，盖上样品瓶的盖子。将上述样品试管和温度控制试《繁：試》管放在水浴锅中，当温度达到80±1℃，开始计时，维持13分钟（用计时器计时）。将热处理过的样品冷却至室温，用0.45um的滤（繁体：濾）膜真《读：zhēn》空过滤。
3.1.3 浊《繁体：濁》汁：
打开水浴锅，调整温度到80±1℃。以无菌操作，取20ml浊汁于已灭过菌的试管中，再移取20ml浊汁于另一带有温度计的20m澳门银河L的试管中，作为温度控制用，盖上样品试管的盖子。将上述样品试管和温度控制试管放在水浴锅中，当温度【读：dù】达到80±1℃时，开始计时，维持13分钟（用计时器计时）。冷却至室温，将热处理的样品用0.45um的滤膜真空过滤。
3.2 培养及计（繁体：計）数
取掉过滤器的上部装置，用灭菌的镊子，将过滤膜从过滤器上取下放在K氏培养基上，轻敲数次，以保证滤膜与培养基接触。倒置于《繁体：於》40-41℃恒温培养箱中，在恒温培养箱底部放置一个有水的盘子，以调整恒《繁体：恆》温培养箱的湿度dù ，培养5天。培养结束后，记录该培养温度下滤膜上的菌落数。
根据对样品的污染情况，可选择稀释度。用灭菌吸管吸取25ml样品，加入到225ml灭菌蒸馏水中，做成1：10的稀释度《拼音：dù》；用灭菌吸管吸取1：10的稀释液25ml，加入[读：rù]到225ml灭菌蒸馏水中，做成1：100的稀释度，稀释后的样品的检测方法同上。培养结束后，记录滤膜上的菌落数，并按相应的稀释度进行计算。
4 数据处理lǐ
结果报告10ml的浓缩清汁样品中含有(拼音：yǒu)的菌落数，报告单位为cfu/10ml。
结果报告150ml的清汁（或水）样(繁体：樣)品中含有的菌落数，报告单位为cfu/150ml。
结果报告20ml的浊汁样品中含有的菌落数，报告(pinyin：gào)单位为cfu/20ml。
参考资料[pinyin：liào]：库克实验室耐热耐酸菌的检测方法。
本文链接：http://21taiyang.com/Gyms/6524122.html
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