分子生物学复习题及其答案分《练：fēn》子生物学的问题？

分子生物学的问题？1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇？保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇

分子生物学的问题？

1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇？

保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化开云体育而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇。8-羟基喹啉是带有淡黄色的固体粉沫，不仅能抗氧化，并在一定程度上能抑制《繁：製》DNase的活性。

2.如何将不同构型的质粒DNA区（繁：區）别开？

由于不同构型的DNA在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率不同，ccc DNA的泳动速度{练：dù}最快，通过凝[读：níng]胶电泳方法可将不{练：bù}同构型的DNA区别开。

3.用酚-氯仿抽提[pinyin：tí]细胞基因组DNA时，通常要[练：yào]在酚-氯仿中加少许异戊醇，为什么？

异戊醇可以降低表面张力，从而减少气泡产生。另外，异戊醇有助于分相，使离心后的上层含DNA的水相[pinyin：xiāng]、中间的变性[练：xìng]蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。

4.用乙醇沉淀【pinyin：diàn】DNA时，为什么加入单价的阳离子？

用乙醇沉淀DNA时，通常要《读：yào》在溶液中加入单价的阳离子，如NaCl 或 NaAc，Na 中和DNA分子上的负电荷，减少DNA分子之间的同性[读：xìng]电荷相斥力，而易于聚集沉淀diàn 。

5.在提《拼音：tí》取RNA时经常使用异硫氰酸胍，有什么作用？

RNA是一种极易降解的核酸分子。高浓度强变性剂异硫氰酸胍使细胞结构迅速被破坏，使《拼音：shǐ》RNA从细胞中释放出来。同时高浓度异硫【读：liú】氰酸胍还使细胞内的RNA酶失活，使释放出的RNA不被降解。

6.蛋白印迹中封闭液的作(读：zuò)用？

封闭液《读：yè》的作用是封闭未吸附蛋白的部位，以减少《练：shǎo》非特异性结合背景的影响。常用的封闭液yè 有脱脂奶粉、小牛血清等。

7.DNA通常保存在什么缓冲液中(pinyin：zhōng)？

采用TE缓冲液，Tris-HCl的[拼音：de]缓冲系统，加入EDTA可以螯合二价金属澳门银河离子进而抑制依赖于二价金属离子的DNA酶的活性，对DNA起到保护作用。

8.在酶切反应缓冲液中为{练：wèi}什么加入BSA？

通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用澳门巴黎人(拼音：yòng)。

9.简单的[读：de]克隆载体必需包括什么？

复制起qǐ 点；选择标记：主要是抗性基因；多克隆位点：便于外源DNA的插入。

10.用酚抽提细胞DNA时，有什么(繁：麼)作用？

使蛋白质(皇冠体育拼音：zhì)变性。

11.在{练：zài}分离DNA时，要使用EDTA，为什么？

EDTA是金《读：jīn》属离子螯合剂，螯合二价离子，抑制核酸酶的活性。

12.在分离DNA过程中，造成DNA分子断裂的de 因素有哪些？

核酸酶降解；化学降解；物（练：wù）理剪切。

13.使用离{繁体：離}心机应注意什么？

首先应该根据自己的实验需求选择合[繁体：閤]适的离心机和转子以及离心管，使用离心机时的工作转速不应该超过离心机、转(繁体：轉)子以及离心管的最大允许转速。离心前注意严格平衡样品。安装转子和转子盖要规范、准确。离心时要留人看守，发现离心机异常应立即关闭离心机。离心结束后要安放好转子

14.分子生物学实验室常用的灭菌方法有哪些？

高(gāo)压蒸汽灭菌、干热灭菌、化学药剂消毒、过滤除菌

15.使用移液器《练幸运飞艇：qì》有哪些注意事项？

垂直吸液、慢吸慢放；选择合适的量程范围，不能超过量程使用；选择与移液器匹配的枪头，安装《繁：裝》枪头时不要用力太tài 猛；移液器每日用完后{练：hòu}，应旋到最大刻度。