石蜡切片的基本原[读：yuán]理

石蜡切片的制作步骤（附图）？1、取材确定所取材料的来源及部位，纵切还是横切；取材要迅速，防止阻止发生进一步变化，材料体积要适宜，下图为植物芽体取样实拍。2、固定最常用的固定液为FAA（万用固定液）。它的优点是材料固定时间不受限制，固定时间短则数小时，长则数月或数年

石蜡切片的制作步骤（附图）？

1、取材

确定所取材料的来源及部位，纵切还是横切；取材要迅速，防止阻止发生《拼极速赛车/北京赛车音：shēng》进一步变化，材料体积要适宜，下图为植物芽体取样实拍。

娱乐城2、固《pinyin：gù》定

最常用的固定液为FAA（万用固定液）。它的优点是材料固定时shí 间不受限制，固定时间短则数小时，长则数(繁：數)月或数年。冲洗或huò 漂洗：组织固定后应充分水洗，除去留在组织内的固定液及其结晶沉淀，否则会影响以后的染色效果。下图为固定液浸泡的组织切块。

3、脱【繁：脫】水

目的：水和透明剂不能互溶，只有脱去水（shuǐ）分后，才能让透明剂进入。

试剂：梯【tī】度酒精溶液

流程：70%---85%---95%--100%--- 100% 每(练：měi)步1h-2h左右。

注意事项：保证脱水梯度和每一步脱水时间，水要完全脱净，但也不能过度脱水（过久使组织变脆、收缩，这个时间大家可以根据自己的实验来摸索一下，不必完全按照本操作来）。

下图为自动组织脱水机（繁：機），适于大量样（繁体：樣）品组织脱水【pinyin：shuǐ】用。如果材料体积及样品量较少可用小烧杯做容器来进行逐级脱水。

4、浸蜡与亚博体育包【拼音：bāo】埋

目的：用石蜡取代透明剂，使石蜡浸入[rù]组织而起支持作用。

浸[jìn]蜡程序:#28恒温#29

（1）低[dī]温浸蜡（36℃）：接上步，在有二甲苯和材料的烧杯中{pinyin：zhōng}逐步加碎suì 蜡至过饱和（石蜡不能溶解），过夜12-24h。

（2）高温浸蜡（55-60℃，高于（繁体：於）石蜡熔点3℃ ）：

将上步[读：bù]二甲苯与石蜡的混合液倒出，不要倒掉材料，将烧杯中加入纯石蜡，世界杯共5-24h。纯石蜡需要更换三次。

关于石蜡的[练：de澳门新葡京]选择石蜡熔点：

对于较硬的材料【pinyin：liào】，用熔点较高的石蜡进行包埋；

当切片较薄时（在8μm以下），选用熔点较高的石shí 蜡包埋；

夏xià 季宜采用yòng 熔点较高的石蜡（56，58℃），冬季宜选用(练：yòng)熔点较低的石蜡（52，54℃）。

5、切（qiè）片

传统的切qiè 片方法是将[繁体：將]包埋好的蜡块用刀片修成规整的梯形，粘于小木块上，上机切片。

新型的切片方法是将包埋框（见下图）代替木块的支撑作用，上[shàng]机切片。切片的厚度可以根据自己的实验要求来确定，一般在8μm-20μm范围内。（下{xià}图为传统切片机与新型自动切片机）

6、粘片（练：piàn）与烤片

粘片：用粘片剂将蜡片牢附于载玻片上，防止在后续的操作中材料脱落。在载玻[bō]片上涂抹粘片剂（甲液），再滴蒸馏水（乙液），放{pinyin：fàng}上蜡片，用滤纸吸取{拼音：qǔ}多余的水分。

烤片：将载玻片放于40℃展片台《繁体：颱》中烤干。

7、脱蜡与复（繁体：覆）水、染色

脱蜡目的：干燥后的切片需脱蜡及复水才能在水溶性染《练：rǎn》液中进行染色。

复水目的：脱蜡后的材料，如果不经过复水，直接进入染色剂中，材料将【jiāng】会严重变《繁体：變》形，甚至难以染色。

染色目的：使细胞组织内的不同结构呈现不同的颜色和足够强的差异以便于(繁：於)观察{拼音：chá}。

总体流程：二甲苯→1/2 二甲苯 1/2纯酒精→100%酒精→95％酒精→85％酒精→番红（4h以上）→95％酒精→固绿【繁：綠】（迅速）→95％酒精（迅速）→100%酒精→1/2 二甲苯 1/2纯酒精→二甲苯→二甲苯，以上【shàng】各级约需5～10分钟，已注明时间的除外。

染色剂：1%番红（85%酒精配(读：pèi)制）

0.5%固绿（95%酒精配pèi 制）

8、切片(piàn)脱水、透明和封固

接上步，在载玻片上滴加适量（1～2滴）中性树胶，再将洁净盖玻片倾斜放下，进行封片。切片放入42℃温箱中干燥过夜。镜检[拼音：jiǎn]，将合格的切片贴上标签。封固剂选择加拿大树胶（Canada balsam）或中性树胶。至此，植物组织的石蜡切片大功告成！（下图为加拿大（pinyin：dà）树胶）