分子生物学复习题及其答案分子生物学的问题[繁体：題]？

分子生物学的问题？1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇？保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇

分子生物学的问题？

1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇？

保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚幸运飞艇的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯（繁：巰）基乙醇。8-羟基喹啉是带有淡黄色的固体粉沫，不仅能抗氧化，并在一定程度上能抑制DNase的活性。

2.如何将不同（繁体：衕）构型的质粒DNA区别开？

由于不同构型的DNA在琼(繁体：瓊)脂糖凝胶电泳中的迁移率不同，ccc DNA的泳动(繁：動)速度最快，通过凝胶电泳方法可将不同构型的DNA区《繁体：區》别开。

3.用酚-氯仿抽提细胞基澳门威尼斯人因组DNA时，通常要在酚-氯仿中加少许异（繁：異）戊醇，为什么？

异戊醇可以降低表面张力，从而减少气泡产生。另外，异（繁：異）戊醇有助于分相，使离心后的上{拼音：shàng}层含DNA的水相、中间（繁：間）的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。

4.用乙醇沉(pinyin：chén)淀DNA时，为什么加入单价的阳离子？

用乙醇沉淀DNA时，通常要在溶液开云体育中加入单价的阳（繁体：陽）离子，如NaCl 或 NaAc，Na 中和DNA分子上的负电荷，减少DNA分子之间的同性电荷相斥力，而易于聚集沉淀。

5.在【读：zài】提取RNA时经常使用异硫氰酸胍，有什么作用？

RNA是一种极易降解的核酸分子。高浓度强变性剂异硫氰酸胍使细胞结构迅速被破坏，使RNA从细胞中释放出来。同时高浓度《dù》异硫氰酸胍还使细胞亚博体育内的RNA酶失活，使释放出的RNA不被降解。

6.蛋白印迹中封闭液的作用？

封闭液的作用是封闭未吸附蛋白的部位，以减少非特异性结（繁：結）合背景的影响。常用的封闭液有脱[繁：脫]脂奶粉、小牛血清等。

7.DNA通常保（练：bǎo）存在什么缓冲液中？

采用TE缓冲液，Tris-HCl的（练：de）缓冲系统，加入EDTA可以螯合二价金属离子进而抑制依赖于（繁体：於）二价金属离子的DNA酶的活性，对DNA起到保护《繁体：護》作用。

8.在酶切反应（读：yīng）缓冲液中为什么加入BSA？

通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作{练：zuò}用。

9.简单的克隆载体必需包括什(shén)么？

复[繁体：覆]制起点；选择标记：主要是抗性基因；多克隆位点：便于外源DNA的插入。

10.用酚抽[读：chōu]提细胞DNA时，有什么作用？

使蛋（练：dàn）白质变性。

11.在分[读：fēn]离DNA时，要使用EDTA，为什么？

EDTA是金属离子螯合剂，螯合二价离子，抑制核酸酶的活（拼音：huó）性。

12.在分离DNA过程中，造成DNA分子断(繁体：斷)裂的因素有哪些？

核酸酶降解【拼音：jiě】；化学降解；物理剪切。

13.使用离心机应注意什shén 么？

首先应该根【练：gēn】据自己的实验需求选择合适的离心机和转子以及离心管，使用离心机时的工作转速不应该超过离心机、转子以及离心管的最大允许转速。离心前注意严格平衡样品。安装转子和转子盖要规范、准确。离心时要留人看守，发现离心{练：xīn}机异常应立即关闭离心机

离心结束后要安ān 放好转子。

14.分子生物{读：幸运飞艇wù}学实验室常用的灭菌方法有哪些？

高压蒸汽灭菌、干热灭菌、化学药[繁：藥]剂消毒、过滤除菌

15.使用移液器有哪些注意{读：yì}事项？

垂直吸液、慢吸慢放；选择合适的量程范围，不能超过量程使用【拼音：yòng】；选择与移液器qì 匹配的枪头，安装枪头时不要用力太猛；移液器每日用完后，应旋到最大刻度。