石蜡切片的基【读：jī】本原理

石蜡切片的制作步骤（附图）？1、取材确定所取材料的来源及部位，纵切还是横切；取材要迅速，防止阻止发生进一步变化，材料体积要适宜，下图为植物芽体取样实拍。2、固定最常用的固定液为FAA（万用固定液）。它的优点是材料固定时间不受限制，固定时间短则数小时，长则数月或数年

石蜡切片的制作步骤（附图）？

1、取材

确定所取材料的来源及部位，纵切还是[练：shì]横[繁体：橫]切；取材要迅速，防止阻止发生进一步变化，材料体积要适宜，下图为植物芽体取样实拍。

2、固{练：gù}定

最常用的固定液为FAA（万用固定液）。它的优点是材料固定时间不受限制，固定时间短则数小时，长(繁：長)则数月或数年。冲洗或漂洗：组织固定后应充分水洗，除去留在组织内的固定液及其结晶沉淀开云体育，否则会影响以后的染色效果。下图为固定液浸泡的组织切块。

3、脱(繁：脫)水

目的：水和透明剂不能互溶，只有脱去水分{pinyin：fēn}后，才能让透明剂进入。

试剂：梯度酒(拼音：jiǔ)精溶液

流{liú}程：70%---85%---95%--100%--- 100% 每步1h-2h左右。

注意事项：保证脱水梯度和每一步脱水时间，水要完全脱净，但也不[pinyin：bù]能过度脱水（过久使组织变脆、收缩，这个时间大家可以根据自己的实验来摸索一下，不必完全[拼音：quán]按照本操cāo 作来）。

下图为自动组织脱水机，适于大量样品组织【繁：織】脱水用。如果材料体积及样品量较少可用(读：yòng)小烧杯做容器来进行逐级脱水。

4、亚博体育浸【读：jìn】蜡与包埋

目的：用石蜡取代透明剂，使石蜡浸入组织而起《读：qǐ》支持作用。

浸jìn 蜡程序:#28恒温#29

（1）低温浸蜡（36℃）：接上步，在有二（读：èr）甲苯和材料的烧杯中逐步（拼音：bù）加碎蜡至过饱和（石蜡不(练：bù)能溶解），过夜12-24h。

（2）高（读：gāo）温浸蜡（55-60℃，高于石蜡熔点3℃ ）：

将上步二甲苯与石蜡的混合液yè 倒出，不要倒掉材料，将烧杯中加入纯石蜡，共5-24h。纯[繁体：純]石蜡需要更换三次。

关于石蜡的选择石蜡熔点[繁：點]：

对于较硬的材料，用熔点较高的石蜡进（繁体：進）行包埋；

当切片较薄时（在8μm以下），选用熔点《繁：點》较高的石蜡包埋；

夏季宜采用熔点d开云体育iǎn 较高的石蜡（56，58℃），冬季宜选用熔点较低的石蜡（52，54℃）。

5、切[拼音：qiè]片

传统的切片方法是将包埋好的蜡块用刀片修成（读：chéng）规整zhěng 的de 梯形，粘于小木块上，上机切片。

新型的切片方法是将包埋框（见下图）代替木块的支撑作用，上机切片。切片的厚度可以根据自己的实验要求来确定，一般在8μm-20μm范围内。（下图为传统切片机与新型自动切片机）

6、澳门金沙粘片与烤{读：kǎo}片

粘片：用粘片剂将蜡片牢附于载玻片上，防止在后续的操作中材[pinyin：cái]料脱落。在载玻片上涂抹粘片[拼音：piàn]剂（甲液），再滴蒸馏水（乙液），放上蜡片，用滤纸吸取多余的水分【练：fēn】。

烤片：将《繁体：將》载玻片放于40℃展片台中烤干。

7、脱蜡与(繁：與)复水、染色

脱蜡目的：干燥后的切片需脱蜡及复水才能在水溶性染rǎn 液中进行染色。

复水目的：脱蜡后的材料，如果不(练：bù)经过复澳门博彩水，直接进入染色剂中，材料将会严重变形，甚至难以染色。

染色目的：使[shǐ]细胞组织内的不同结构呈现不同的颜色和足够强的差异以便(读：biàn)于[繁体：於]观察。

总体流程：二甲苯→1/2 二甲苯 1/2纯酒精→100%酒精→95％酒精→85％酒精→番红（4h以上）→95％酒精→固绿（迅速）→95％酒【pinyin：jiǔ】精（迅速）→100%酒精→1/2 二甲苯 1/2纯酒（练：jiǔ）精→二甲苯→二èr 甲苯，以上各级约需5～10分钟，已注明时间的除外。

染色剂：1%番红（85%酒精配制[zhì]）

0.5%固绿（95%酒精配（练：pèi）制）

8、切片脱[繁体：脫]水、透明和封固

接上步，在载玻片上滴加适量（1～2滴）中性树胶，再将洁净盖玻片倾斜放下，进行封片。切片放入42℃温箱中干燥过夜。镜检，将合格的切片贴上标签。封固剂选择加拿大树shù 胶（Canada balsam）或中性树胶。至此，植物组织【繁：織】的石蜡切片大功告成！（下图为加拿大树胶）