分子生物学复习题及其答案分子【读：zi】生物学的问题？

分子生物学的问题？1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇？保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇

分子生物学的问题？

1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇？

保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少皇冠体育量巯基{jī}乙醇。8-羟基喹啉是带有淡黄色的固体粉沫，不仅能抗氧化，并在一定程度上能抑制DNase的活性。

2.如何将不同构[繁：構]型的质粒DNA区别开？

由于不同构型的DNA在琼脂糖凝极速赛车/北京赛车胶电泳中的[拼音：de]迁移率不同，ccc DNA的泳动速度最快，通过凝胶电泳方法可将不同构型的DNA区别开。

3.用酚-氯仿抽提细胞基因组DNA时，通常要在【拼音：zài】酚-氯仿中加少许异戊醇，为《繁：爲》什么？

异戊醇可以降低表面张力，从而减少气泡产生。另外，异戊醇有助于分相，使离心(pinyin：xīn)后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋（读：dàn）白相及下层有机溶剂相维持稳定。

4.用乙醇沉淀DNA时，为什(pinyin：shén)么加入单价的阳离子？

用乙醇沉淀DNA澳门巴黎人时，通常要在溶液中加入单价的阳离子，如NaCl 或 NaAc，Na 中和DNA分子上的负电荷，减少DNA分子之【读：zhī】间的同性电荷相斥力，而易于聚集沉淀。

5.在提取RNA时《繁体：時》经常使用异硫氰酸胍，有什么作用？

RNA是一种极易降解的核酸分子。高浓度强变性剂异硫（liú）氰酸胍使细胞结构迅速被破坏，使RNA从细胞中释放出来。同时高浓度异硫氰酸胍还使细胞内的RNA酶失活，使释放出《繁体：齣》的RNA不被降解。

6.蛋白印迹中封闭液的作【练：zuò】用？

封{pinyin：fēng}闭液的作用是封闭未吸附蛋白的部位，以减少非特（拼音：tè）异性结合背景的影响。常用的封闭液有yǒu 脱脂奶粉、小牛血清等。

7.DNA通常保存在什（pinyin：shén）么缓冲液中？

采用TE缓冲液，Tris-HC澳门新葡京l的缓冲系统，加入EDTA可以《拼音：yǐ》螯合二价金属离子进而抑制依赖于二价金属离子的DNA酶的活性，对DNA起到保护作用。

8.在酶切反应缓冲液中为什么加入BSA？

通过提{pinyin：tí}高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。

9.简单{pinyin：dān}的克隆载体必需包括什么？

复制起点；选择标记：主要是抗性基因；多克隆位点：便于外源DNA的插[chā]入。

10.用酚【fēn】抽提细胞DNA时，有什么作用？

使蛋白质变性《读：xìng》。

11.在（pinyin：zài）分离DNA时，要使用EDTA，为什么？

EDTA是金属离子螯合（繁体：閤）剂，螯合二价离子，抑制核酸酶的活性。

12.在（pinyin：zài）分离DNA过程中，造成DNA分子断裂的因素有哪些？

核酸酶降解；化学降解；物理[练：lǐ]剪切。

13.使用离心机应注意(yì)什么？

首先应该根据自己的实验需求选择合适的离心机和转子以及离心管，使用离心{练：xīn}机时的工作转速不应该超过离心机、转子以及离心管的最大允许转速。离心前注意严格平衡样品。安装转子和转子开云体育盖要规范、准确。离心时要留人看守，发现离心机异常应立即关闭离心机。离心结束后要安放好转子

14.分子（读：zi）生物学实验室常用的灭菌方法有哪些？

高压蒸汽灭菌、干热灭菌、化学药剂消毒【读：dú】、过滤除菌

15.使用移液器有哪些注意事[练：shì]项？

垂直吸液、慢（读：màn）吸慢放；选择合适的量程范围，不能超过量程使用；选择与移液器匹配的《拼音：de》枪头，安装枪头时不要用力太猛；移液器每日用完后，应旋到最大(pinyin：dà)刻度。