物理破碎法的优点？物理破碎法：指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎开来。1．用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂#28借助超声的震动力破碎细胞壁和细胞器）。机制：可能与强声波作用溶液时，气泡产生、长大和破碎的空化现象有关，空化现象引起的冲击波和剪刀力使细胞裂解
物理破碎法的优点？
物理破碎法：指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎开来。1．用一定功率的超声波处理细(繁：細)胞悬液，使细胞急剧震荡破裂#28借（繁：藉）助超声的震动力破碎细胞壁和细胞器[qì]）。
机制：可能与强声波作用溶液时，气《繁：氣》泡产生、长大（读：dà）和破碎的空化现象有关，空化现象引起的冲击《繁体：擊》波和剪刀力使细胞裂解。
超声(繁：聲)波破碎的效率取决于声频、声能、处理时间、细胞浓度和细胞类《繁：類》型等。（使用时注意降温，防止过热{pinyin：rè}）。
2. 高压破碎：细胞悬浮液从高压室的环[huán]状隙喷射到静止的撞击环上，被迫改变方向经出口管流出。此过程中{pinyin：zhōng}细胞经历了高速造成的剪切的碰撞及高压到常压的变化，从而破碎释放内含物。
这是一种温（读：wēn）和的、彻底破碎细胞的较理想的方法。
3. 反复冻融法：将细《繁：細》胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成（练：chéng）和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破《读：pò》碎
我想知道细胞破碎的方法及各种方法的原理和优缺点？
机械法：主要通过机械切力的作用使组织细胞破碎的方法，常用的器械有组织捣碎机、匀浆器、研钵和研磨、压榨器等。1. 组织捣碎机[繁体：機]
将材料配【拼音：pèi】成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至最慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度。一般用于动物组织(繁：織)、植物肉质种子、柔嫩的叶芽等，转速可高达10000rpm/M以上。由于旋转刀片的机械切力很大，制备一些较大分子如核酸则很少使用。
2. 匀浆【pinyin：jiāng】器
先将剪碎的组织置于管中，再套入研杆来回研磨，上下移动，即可将细胞研碎。匀浆器的研钵磨球和玻璃管内壁之间间隙保持在十分之几毫米距离。制作匀浆(繁：漿)器的材料，除玻璃外，还可以用硬质塑料、不锈钢、人造荧光树脂等。此法细胞破碎程度比幸运飞艇高速组织捣碎机为高，适用于量少和动物脏器组织。
存在的问题；较易造成堵塞的{de}团状或丝状真菌，较小的革兰氏阳性首以及有些亚细{繁体：細}胞器，质地坚硬，易损伤匀浆阀，也[练：yě]不适合用该法处理。
3. 研钵[繁体：鉢]
多用于细菌或其他坚硬植物材料，研磨时常加入少量石英砂，玻璃粉或其他(tā)研磨剂，以提tí 高研磨效果。
4. 细[繁体：細]菌磨
是一种改良了的研磨器，比研钵具有更大的研磨面积(繁体：積)，而且低部有出口。操作时先把细菌和研磨粉调成糊状，每次加入一小勺，研磨澳门新葡京20-30秒即可将细菌细胞完全磨碎。
物理法：主要《拼音：yào》通过各种物理因素使组织细胞破碎的方澳门新葡京法。在生化制备中常用的方法有：
1. 反（拼音：fǎn）复冻溶法
原理：因突然冷冻，细胞内冰晶的形成[pinyin：chéng]及 胞内外【pinyin：wài】溶剂浓度的突然改变而破坏细胞。
方法：将待破碎的细胞在-20度以（yǐ）下【读：xià】冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶[练：róng]胀，使细胞结构破碎。
特点：此法适用于组织细胞，多用于动物性材cái 料，对微生物细胞作用较差。
2. 急热（繁体：熱）骤冷法
将材料投入沸水中，维持85-90分钟（繁体：鈡），至水浴中急速冷却，此【cǐ】法可用于细菌及病毒材料。
3. 超声波处{练：chù}理
用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂，此法多适用于微生物材料，用大肠杆菌制备(繁：備)各种酶，常选用50-100毫克菌体/毫升浓度，频高gāo 于（繁体：於）15～20KHz的超声波《练：bō》在高强度声能输入下可以进行细胞破碎。其破碎机理：可能与空化现象引起的冲击波和剪切力有关。超声破碎的效率与声频、声能、处理时间、细胞浓度及首种类型等因素有关。
特点：操作（zuò）简单，重复性较好，节省时间；多用yòng 于微生物和组织细胞的破碎。
存在问题：超声波破碎在实验室规模应用较普遍，处理少量样品时操作简便，液量损失（拼音：shī）少，但是超声波产生的化学自由基团能使某些敏感性活性物质变性失活。而且大容量装置声能传(chuán)递，散sàn 热均有困难，应采取相应降温措施。对超声波敏感和核酸应慎用。空化作用是细胞破坏的直接原因，同时会产生活性氧，所以要加一些巯基保护剂。
化学（繁：學）及生物化学法：
1. 自溶《拼音：róng》法
在一定PH和适当的温度下，利用组织细《繁体：細》胞内自身的酶系统将细胞破碎的方法。此过程娱乐城需较长时间，常用少量防腐剂如甲苯、氯仿等防止细胞的污染。
2. 酶溶（pinyin：róng）法
利用各种水解（pinyin：jiě）酶，如溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶、半纤维素酶、脂酶【读：méi】等，将细胞壁分解，使细胞内含物释放出来。有些细菌对溶菌酶不敏感，加入少量巯基试剂或[练：huò]8摩尔尿素处理后，使之转为对溶菌酶敏感而溶解。
特(tè)点：
a#29 此法[练：fǎ]适用多种微生物；
b#29 具有作用条件温和hé ；
c#29 内含物成分不易受[练：shòu]到破坏；
d#29 细胞壁娱乐城损坏的程度可以控{pinyin：kòng}制。
存在的问题：易造成产物抑制作用，这可能是导致胞内物质释放率低的一个重要因素。而且溶酶价格高，限制了大规模利用。若回收溶酶，则又增加百分离纯化（huà）溶酶的[练：de]操作。另外酶溶法通用性差，不同菌种需选择《繁体：擇》不同的酶。有一定局限性，不适宜大量的蛋白质提取，给进一步纯化带来困难
3. 化学《繁：學》渗透法
某些有机溶剂（如苯、甲苯）、抗生素、表面活性剂、金属[繁体：屬]螯合剂、变性{xìng}剂等化学药品都可以改变细胞壁或《拼音：huò》膜的通透性从而使内合物有选择地渗透出来。其作用机理；化学渗透取决于化学试剂的类型以及细胞壁和膜的结构与组成。
特点：多用于破碎细菌，且作用比较温和；提取核酸时，常用此法破碎细胞。
存在的问题：时间长，效率《拼音：lǜ》低；化学试（繁体：試）剂毒性较强，同时对产物也有毒害作用，进一步分离{繁体：離}时需要用透析等方法除去这些试剂；通用性差：某种试剂只能作用于某些特定类型的微生物细胞。
小结{繁体：結}
无论用哪一种方法破碎组织细胞，都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中zhōng ，使大分子生物降解，导致天【拼音：tiān】然物质量的减少，加入二异丙基氟磷酸（DFP）可以抑制或减慢自溶作用；加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性，加入苯甲磺酰氟化物（PMSF）也能清除蛋白水解酶活力，但不是全部{pinyin：bù}，还可通过选择pH、温度或离子强度等，使这些条件都要适合于目的物质的提取。
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