求助淡水硅藻的分离方法和培养基的配方?藻种的分离藻类培养首先要有藻种。从天然水域的混杂生物群中,用一定方法把所需藻类个体分离出来,而获纯种培养。这种方法称为藻种分离和纯化,又称纯培养法。真正的“纯种培养”是指在排除包括细菌在内的一切生物的条件下进行的培养
求助淡水硅藻的分离方法和培养基的配方?
藻种的分离藻类培养首先要有(读:yǒu)藻种。从天然水域的混杂(繁体:雜)生物群中,用一【yī】定方法把所需藻类个体分离出来,而获纯种培养。这种方法称为藻种分离和纯化,又称纯培养法。
真正的“纯种培养”是指在排除包括细菌在内的一切qiè 生物的条件下进行的培养。这是进行科学研究不可缺少的技术,而在生产性培养中不排除细菌的称之【zhī】为“单种培养”。
(1)采样和预备培养:首先要采集有【pinyin:yǒu】需要分离藻类的水样,采回后在显微镜下检查。如发现需要分离的藻类数量较多时,可立即分澳门永利离。若数量很少,最好先进行预备培养,待其增多后,再分离。
用作预备培养的培养液,各种藻类是不同的,对一些难以培养的藻类一般加入土壤抽出液较好。预备培养液营养成分浓度应小些,一般只有原配方的1/4~1/2。如水样中藻类种类较多,就应使用几种不同的培养液,使藻类在适合于自己繁殖的培养液中繁殖起来。
可用三角烧瓶或试管作培养容器,加入容量1/4~1/3培养液。然后把经筛绢过(拼音:guò)滤除去大型浮游生物的水样接种进去,放在合适温度(练:dù)下或室内靠北窗口下培养。在培养附着藻类时,容器可静止不动;而培养浮游藻类时(拼音:shí),应该每天摇动一次。
有的藻类在普通培养液中完全不能繁殖[练:zhí],有的繁殖非常困难。此时需改变培养液浓度,加入葡萄糖、蛋澳门威尼斯人白胨等有机物,补充微量元素和辅助生长物质,加入土壤抽出液,就有可能获较好效果。
土壤抽出液制作方法:先在试管底部,加入高约1cm土壤(采用腐殖化的农田和庭院土)。再加入水使达5cm开云体育,塞上棉塞,采用蒸气间隙灭菌,每天灭菌1小时,连续二天。由于气泡上升,棉塞可能弄脏。因此,最好先在水中煮一段时《繁:時》间,使气泡跑掉后,再加棉塞进行灭菌。
(2)分离方法(拼音:fǎ):常用下列四种。
1)微幸运飞艇吸管(毛细管)分离 选直径较细(约5毫米)玻管,在火焰上加热,待快熔时,快速拉成口径极细的(拼音:de)微吸管。将稀释适度藻液水样,置浅凹载玻片上,镜检。用微吸管挑选要分离的藻体,认真仔细地吸出,放入另一浅凹载片上,镜检这一滴水中是否达到纯分离的目的。如不成功,应反复几次,直至达到分离目的为止。然后移入经灭菌的培养液中培养,一般在每个培养皿中接20~30个个体
从分离出少量细胞扩大培(péi)养到200毫升的培养量,如硅藻一般需20天以上。为了较长时期保存藻种,可将分离到(dào)的藻种用青霉素(1000~5000单位或链霉素(20ppm)处理后,获得较纯藻种。
此(读:cǐ)法【fǎ】操作技(读:jì)术要求高,要细心。往往吸取一个细胞,要反复几次才能成功,且适于分离个体较大藻类。
2)水滴分离法 用微吸管吸取稀释适度藻液,滴到消毒过载片上,水滴尽可能滴小些,要求在低倍镜视野(读:yě)中能看到水滴全部或大部分。一个载片上滴2~4滴,间隔一定距离,作直线排列。如一滴水中只有几个所需同(读:tóng)种藻类个体,无其他生物混杂,即用吸管吸取培养液,把(bǎ)这滴水冲入装有培养液并经灭菌试管或小三角瓶中去。如未成功,需反【fǎn】复重做,直到达到目的。
此法简便易行,尤其(拼音:qí)适宜于分离已在培养液中占优势种类。分离受少量生物污染培养液中的藻类多用此法。操作时同样要求细致、认真(拼音:zhēn),使用工具及培养液经严格消毒。
3)稀释分{读:fēn}离法 把含有需要分离的藻类而又混杂有其他生物的水样,取(练:qǔ)其一定量,用培养(拼音:yǎng)液稀释。通过稀释到适宜程度的方法,达到把原混杂生物单个分离培养的目的。
首先把水样稀释到每一滴含有一个左右的生世界杯物细胞(也可能一个都没有,也可能有两个),在稀释过程中配合显微镜检查,调节稀释度,然后准备装有1/4容量培养液的试管20支,每一试管加入稀释适宜水样一滴,摇匀,进行培养。待藻类生长繁殖达一定浓度时,再检查是(pinyin:shì)否达到分离目的,若未达到,再重复做。
此法操作简单易行,但有【pinyin:yǒu】一定程度盲目性,比不上水滴分离法效果好。
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