进行动物传代培养时用胰蛋白酶分散细胞,细胞?血清终止的原理其实是竞争抑制.就是用过量的牛血清中含有的蛋白来和胰酶结合.不给胰酶消化细胞蛋白的机会. 培养液中有什么一般没有关系,因为你消化无非是为了细胞
进行动物传代培养时用胰蛋白酶分散细胞,细胞?
血清终止的原理其实是竞争抑制.就是用过量的牛血清中含有的蛋白来和胰酶结合.不给胰酶消化细胞蛋白的机会. 培养液中有什么一般没有关系,因为你消化无非是为了细胞传代,培养液终归是要弃去的.除非你要对培养液做成分分析,那可能会影响结果.酶的浓度 胰蛋白酶一般采用的浓度为 0.1%-0.25%(活力 1:200 或 1:250),但遇到难消化的组织时,浓度可适当提高,消化时间适当延长。浓度高对细胞有毒性,而较低浓度的胰蛋白酶在培养液中可促进细胞的增殖,若培养液中加入血清,其少量胰蛋白酶可被血清中抗胰蛋白酶因子所清除。
细胞培养获得成功的关键要素是什么?
1.要保证无菌,包括无菌操作,无菌环境。枪头等要及时灭菌,培养瓶,移液管最好使用一次性的,如果你的细胞比较不好养,最好使用一次性的。2.要传代的时候细胞传亚博体育代的数量不能太少,否则细胞不容易养活。另外,传代不要过度频繁,即使是肿(繁:腫)瘤细胞。
3.不要经常皇冠体育(cháng)用胰酶消化细胞,且消化时间不要过长。
4.幸运飞艇根据细胞生长情况,即《读:jí》使更换新鲜培养基。
5.血清一般要冻存在-20摄氏度幸运飞艇,用的时(繁体:時)候在4摄氏度融化,不要反复冻存,最好用10ml的离心管分装使用。
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