石蜡切片（读：piàn）的基本原理

石蜡切片的制作步骤（附图）？1、取材确定所取材料的来源及部位，纵切还是横切；取材要迅速，防止阻止发生进一步变化，材料体积要适宜，下图为植物芽体取样实拍。2、固定最常用的固定液为FAA（万用固定液）。它的优点是材料固定时间不受限制，固定时间短则数小时，长则数月或数年

石蜡切片的制作步骤（附图）？

1、取材

确定所取材料的来源及部位，纵切还是横切；取材要迅速，防止阻止发[繁体：發]生进一步变化，材料体积要适宜，下图【pinyin：tú】为植物芽体取样实拍。

2、固澳门金沙定【拼音：dìng】

最常用的固定液为FAA（万用固定液）。它的优点是材料固定时间不受限制，固定时间短则数小时，长则数澳门金沙月或数年。冲洗或漂洗：组织固定后应充分水洗，除去留在组织内的固定液及其结晶沉淀[繁：澱]，否则会影响以后的染色效果。下图为固定液浸泡的组织切块。

3、脱[繁体：脫]水

目的：水和透明剂不能互溶róng ，只有脱去水分后，才能让透明剂进入。

试【pinyin：shì】剂：梯度酒精溶液

流{读：liú}程：70%---85%---95%--100%--- 100% 每步1h-2h左右。

注意事项：保证脱水梯度【练：dù】和每一步脱水时间，水要完全脱净，但也不能过度脱水（过久使组织变脆、收缩，这个时间大家可以根据自己的实验来摸[拼音：mō]索一下，不必完全按照本操作来（繁体：來））。

下图为自动组织脱水机，适于大量样品（pinyin：pǐn）组织脱水[练：shuǐ]用。如果材料体积及样品量较少可用小烧杯做容器来进行逐级脱水(练：shuǐ)。

4、浸蜡与包【pinyin：bāo】埋

目的：用石蜡取代透明剂，使石shí 蜡浸入组织而起支持作用。

浸《练：jìn》蜡程序:#28恒温#29

（1）低温浸蜡（36℃）：接上步，在有二甲苯和材[拼音：cái]料的烧杯中逐步加碎蜡至过饱和（石蜡不能溶【练：róng】解），过夜12-24h。

（2）高温浸蜡（55-60℃，高gāo 于石蜡熔点3℃ ）：

将上步二甲苯与石蜡的混合液倒出，不要(pinyin：yào)倒掉材料，将烧杯[繁体：盃]中加入纯石蜡，共5-24h。纯石蜡需【读：xū】要更换三次。

关于石蜡的选择石蜡熔点：

对于较硬的材cái 料，用熔点较高的石蜡进行包埋；

当切片较薄时（在8μm以澳门银河下），选用熔点较（读：jiào）高的石蜡包埋；

夏季宜采用熔点较高（练：gāo）的石蜡（56，58℃），冬季宜选用熔点(拼音：diǎn)较低(拼音：dī)的石蜡（52，54℃）。

5、切[拼音：qiè]片

传统的切片方法是将包埋好的蜡块用刀片修成规(繁：規)整的梯{tī}形，粘于小木块上，上机切片。

新型的切片[练：piàn]方法是将包埋框（见下【读：xià】图）代替木块的支撑作用，上机切片。切片的厚度可以根据自己的实验要求来确定，一般在8μm-20μm范围内。（下图为传统切片机与新型自动切片机）

6、粘片（拼音：piàn）与烤片

粘片：用粘片剂将蜡片牢附于载玻片上，防止（zhǐ）在后续的操作中材料脱落。在载玻片上涂抹粘片剂（甲液），再滴蒸馏水（乙液），放上蜡片，用滤纸吸(拼音：xī)取多余的水分。

烤片：将[繁体：將]载玻片放于40℃展片台中烤干。

7、脱蜡（繁体：蠟）与复水、染色

脱蜡目的：干燥后的切片需脱蜡及复水(练：shuǐ)才能在水溶性染液中进行染色。

复水目《mù》的：脱蜡后(繁体：後)的材料，如果不经过复水，直接进入染色剂中，材料将会严重变形(xíng)，甚至难以染色。

染(拼音：rǎn)色目的：使细胞组织内的不同结构呈现不(拼音：bù)同的颜色和足够强的差异以便于观察。

总（繁体：總）体流程：二甲苯→1/2 二甲苯 1/2纯酒精→100%酒精→95％酒精→85％酒精→番红（4h以上）→95％酒精→固绿（迅速）→95％酒（jiǔ）精（迅速）→100%酒精→1/2 二甲苯 1/2纯酒精→二甲苯→二甲苯，以上各级约需5～10分钟，已注明时间的除外。

染【pinyin：rǎn】色剂：1%番红（85%酒精配制）

0.5%固绿（澳门威尼斯人95%酒精配制(繁：製)）

8、切片脱水、透明和封{fēng}固

接上步，在载玻片上滴加适量（1～2滴）中性树胶，再将洁净盖玻片倾斜放下，进行封片。切片放入42℃温箱中干燥过夜。镜检，将合格的切片贴上标签。封固剂选择加拿大树胶（Canad澳门伦敦人a balsam）或中性树胶。至此，植物组织的石蜡切片大功告成！（下图为加拿大树胶（繁体：膠））