Taq酶的作用? 在PCR技术中,引物的作用是为了使脱氧核苷酸加到模板链上,使新链延长,没有引物,DNA聚合酶是不能将单个的脱氧核苷酸加到模板链上的。 而TaqDNA聚合酶是一种耐高温的DNA聚合
Taq酶的作用?
在PCR技术中,引物的作用是为了使脱氧核苷酸加到模板链上,使新链延长,没有引物,DNA聚合酶是不能将单个的脱氧核苷酸加到模板链上的。 而TaqDNA聚合酶是一种耐高温的DNA聚合酶,是从美国黄石国家公园的一个热泉中的一种耐热细菌中提取的,它的作用就是将脱氧核苷酸加到模板上后,将该脱氧核苷酸与原来的脱氧核苷酸间的磷酸二酯键连在一起,使脱氧核苷酸单链向前延伸,最终形成一个新的双链DNA分子。Taq酶有什么作用?
定量PCR是根据反应中的荧光信号强度来进行定量。现在常用的探针有Taqman,SYBR等几种。TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5#30"-3#30"外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。再通过实时监测整个PCR进程荧光信号的积累,与标准曲线对比进行定量分析。SYBR荧光染料:SYBR荧光染料能特异性地掺入DNA双链,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,这样就保证了荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步
当PCR循环复制时DNA双链也成倍增长,同样SYBR染料的荧光的信号也随之增倍,世界杯通过实时监测整个PCR进程中荧光信号的积累,与标准曲线对比进行定【dìng】量分析。
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